Skip to content

Przeciwciała aktywujące receptor receptora typu 1 Angiotensin II w odrzuceniu alloprzeszczepu nerkowego ad

1 miesiąc ago

494 words

Próbki surowicy pobierano prospektywnie od wszystkich pacjentów podczas epizodów odrzucania i badano pod kątem specyficznych względem dawcy przeciwciał anty-HLA, a także analizowano pod kątem agonistycznych przeciwciał skierowanych przeciwko receptorowi AT1. Badano również próbki surowic od pacjentów z opornym na leczenie steroidem ostrym odrzuceniem naczyń z trzech współpracujących ośrodków (szpital uniwersytecki Charité Hospital Campus Virchow i szpital uniwersytecki Erlangen-Nürnberg, oba w Niemczech oraz Ospedale Civile w Bergamo, Włochy). Pisemną świadomą zgodę na wykorzystanie próbek surowicy do celów badawczych uzyskano od każdego pacjenta, podczas gdy on lub ona czekał na przeszczep. Instytucjonalna komisja rewizyjna Szpitala Uniwersyteckiego w Charité w Berlinie zatwierdziła protokoły. Próbki bioptatów aloprzeszczepu były przetwarzane standardowymi technikami i klasyfikowane zgodnie z klasyfikacją Banff 97, z uaktualnioną oceną stopnia odrzucenia humoralnego.9,10 Próbki biopsyjne wybarwiono przeciwciałami poliklonalnymi dla C4d (Biomedica) 11,12 i czynnikiem tkankowym ( dostarczone przez T. Luther, Drezno).
Początkowa terapia immunosupresyjna składała się z inhibitora kalcyneuryny, mykofenolanu mofetylu, metyloprednizolonu i przeciwciała przeciwko receptorowi interleukiny 2 do indukcji. Pacjenci, którzy byli dodatni w przypadku swoistych dla dawcy przeciwciał anty-HLA lub C4d lub którzy mieli odrzucenie naczyń objawiając się zapaleniem tętnic lub martwiczym zapaleniem naczyń z martwicą włókien nerwowych, byli leczeni plazmaferezą razem z dożylną immunoglobuliną. Pacjenci początkowo leczeni cyklosporyną zostali włączeni do leczenia dużymi dawkami takrolimusu, gdy wykryto refrakcję oporną na leczenie.
Testy biologiczne i analiza epitopów
Próbki surowicy pacjentów badano na obecność IgG aktywującej receptor AT1 w funkcjonalnym teście biologicznym, który obejmuje spontaniczne pobicie hodowanych kardiomiocytów szczurzych noworodków, które eksprymują kilka receptorów sprzężonych z białkiem G, w tym receptor AT1. Zmiany stanu aktywacji komórek mierzy się bezpośrednio przez zliczanie szybkości bicia za pomocą komputerowej analizy obrazu. Procedury izolowania, hodowania i wykrywania zostały szczegółowo opisane wcześniej.13 Stosunek dawka-odpowiedź pomiędzy aktywacją stężenia IgG lub angiotensyny II a spontaniczną szybkością bicia jest liniowy.
Aby zbadać swoistość odpowiedzi zależnej od receptora AT1, komórki stymulowane IgG leczono blokerem receptora AT1 lub blokerem receptora angiotensyny II typu 2 (AT2). Krótkie, zachodzące na siebie syntetyczne peptydy odpowiadające sekwencji drugiej pozakomórkowej pętli receptora AT1 zastosowano do identyfikacji epitopów. Aby zidentyfikować podklasę IgG, IgG od 10 pacjentów, od których dostępna była wystarczająca ilość surowicy, leczono mysimi przeciwciałami monoklonalnymi antyludzkimi IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4.
Analiza powierzchniowo-plazmon-rezonans
Wiązanie przeciwciała receptora AT1 zweryfikowano i określono ilościowo za pomocą analizy powierzchniowo-rezonansowej plazmon (BIAcore). Frakcja IgG od pacjentów dotkniętych chorobą lub kontrolna ludzka IgG została przeniesiona na biotynylowane peptydy załadowane na chipie unieruchomionym streptawidyną w biosensorze (BIAcore) przy różnych szybkościach przepływu. Po fazie asocjacji i fazie dysocjacji określono względny wzrost odpowiedzi peptydu receptora AT1 i peptydu kontrolnego (receptor .2-adrenergiczny)
[hasła pokrewne: nfz sanatoria lista oczekujących gdańsk, trójtlenek arsenu, fosfeny ]
[podobne: ból w dolnej części pleców, ból żuchwy, boląca pięta ]

0 thoughts on “Przeciwciała aktywujące receptor receptora typu 1 Angiotensin II w odrzuceniu alloprzeszczepu nerkowego ad”

  1. Ułożenie chorego na boku uchroni poszkodowanego przed zachłyśnięciem się własnymi wydzielinami.